Signal Transduction and Targeted Therapy | 神经生长因子信号的激活限制了肝细胞癌中对 lenvatinib 的反应

对 lenvatinib 的耐药性仍然是治疗晚期肝细胞癌（HCC）的主要障碍，凸显了阐明其潜在机制和确定可行治疗靶点的紧迫性。本研究中，我们鉴定出一种源自肝囊细胞的神经分泌因子——神经生长因子（NGF），作为伦伐替尼耐药性的关键介质。利用创新的体内体外交叉循环策略，我们建立了表型稳定的 lenvatinib 耐药 HCC 细胞系（LenR 细胞）。通过对调控培养基的蛋白质组筛选及后续功能验证，我们证明随着耐药性的获得，NGF 分泌会逐渐增加。从机制上看，我们发现 SRPK1-SRSF1 轴通过调控其前体转录本的替代剪接，促进更短且翻译效率高的异构体（proNGF-B）表达，从而促进 NGF 的增强产生。NGF 升高随后通过其高亲和受体 TrkA 激活非典型 MAPK 通路（MEK5-ERK5），从而在持续酪氨酸激酶抑制压力下维持肿瘤细胞的存活和增殖。关键的是，TrkA 与临床批准的抑制剂拉罗曲替尼药物共靶向恢复了患者来源类器官和异种移植模型中的 lenvatinib 敏感性，产生显著的抗肿瘤协同效应，且无加重毒性证据。对两组独立患者队列的临床分析进一步证实，NGF 表达升高与对 lenvatinib 反应不良、无复发期缩短及整体生存期较差显著相关。 我们的发现揭示了肿瘤来源 NGF 在通过精确转录后调控回路协调适应性信号传导中的关键且此前被低估的作用，并提出了一种易于翻译的生物标志物引导组合策略，以克服肝细胞癌中 lenvatinib 耐药性。

该研究以题为“Activation of Nerve Growth Factor signaling limits the response to lenvatinib in hepatocellular carcinoma”发表在Signal Transduction and Targeted Therapy 上。

图1

对抗性相关分泌因子的筛查。 a 体内体外交叉循环策略示意，用于生成lenvatinib耐药HCC细胞系（LenR细胞）。 b 裸鼠G0至G4正位肝肿瘤的代表性生物发光成像。 c IC50 用lenvatinib处理的G0-G4细胞值持续96小时。 d 通过流式细胞术分析含有lenvatinib的新鲜培养基和同一LenR-G4生成的调质上清液处理的LenR-G4细胞凋亡。代表性图像（左）和凋亡细胞的平均数量（右）显示。 e 在增加lenvatinib浓度下对G0-G4细胞进行长期发声检测。 f 长期在G4上清液中培养的G0和G4的克隆生成测定，无论是否使用外泌体抑制剂GW4869。 g G4和G0上清液中分泌蛋白表达差异，重点介绍了六个上调最显著的蛋白质。 h TGFB1、CDNF、PSPN、NRTN、MANF和NGF在G0-G4世代的表达分析。 i 基于ELISA的定量G0和G4（UP）上清液中的EGF、VEGFA、HGF、IGF-1、FGF2、FGF10、FGF19和FGF23。上清液中的NGF、MANF和VEGFA浓度从G0-G4（下降）到以下。 j 在NGF、VEGF和MANF浓度达到规定浓度的情况下，用lenvatinib处理G0的长期克隆原检测。图中数据 c 以及 i 以三个独立实验±SEM的平均值表示。*p < 0.05， **p < 0.01， ***p < 0.001。ns，不显著;肝细胞癌，肝细胞癌

总结

本研究通过体内-体外交叉循环策略，成功建立了表型稳定的乐伐替尼耐药肝细胞癌细胞系，并发现耐药细胞中神经生长因子（NGF）分泌水平显著升高。机制上，SRPK1激酶上调并磷酸化剪接因子SRSF1，促进SRSF1入核并选择性结合NGF前体mRNA，驱动其剪接为翻译效率更高的短异构体proNGF-B，从而在不改变转录和蛋白降解的前提下大幅提升NGF蛋白产量。分泌的NGF通过高亲和力受体TrkA激活非经典MAPK通路（MEK5-ERK5），而非经典的MEK1/2-ERK1/2分支，从而在乐伐替尼持续压力下维持肿瘤细胞存活与增殖

参考消息：

DOI: 10.1038/s41392-026-02649-w