重度抑郁症（MDD）是一种常见的心理障碍，对患者的社会和心理功能造成显著影响，亟需创新疗法。环状RNA（circRNA）已被证实参与MDD的发病机制，并被认为是极具潜力的治疗靶点。然而，目前针对抑郁症的circRNA靶向递送策略研究尚不充分。本研究发现，在MDD患者的血浆样本中，circMBNL1显著上调，且与24项汉密尔顿抑郁量表（HAMD-24）评分呈正相关。此外，在慢性不可预测应激（CUS）模型小鼠脑内的小胶质细胞中，circMBNL1也显著上调。为了实现小胶质细胞中circMBNL1的特异性敲低，我们利用MG1肽修饰聚乙二醇/聚乙烯亚胺（PEG/PEI）基纳米颗粒，并通过鼻内给药将siRNA（TNP-si-circMBNL1）靶向递送至活化的小胶质细胞。体外和体内研究表明，TNP-si-circMBNL1能够高效地将si-circMBNL1递送至活化的微胶质细胞，从而显著降低circMBNL1的表达。值得注意的是，鼻内给药TNP-si-circMBNL1可有效改善小鼠慢性不可预测应激（CUS）诱导的抑郁样行为。这些结果表明circMBNL1与重度抑郁症（MDD）相关，而靶向circMBNL1的肽引导siRNA纳米颗粒（TNP-si-circMBNL1）在抑郁症治疗中展现出巨大的潜力。

该研究以题为“Targeting microglial circMBNL1 unlocks a novel nanomedicine therapeutic strategy for major depressive disorder”发表在Journal of Nanobiotechnology 上。

图1

示意图说明TNP-si-circMBNL1的作用机制，这是一种设计用于治疗重度抑郁症的靶向纳米药物。CircMBNL1在MDD患者血浆样本中显著上调，并与24项汉密尔顿抑郁量表评分呈正相关。经小胶质细胞归巢肽修饰的PEG/PEI纳米颗粒将siRNA递送至小鼠脑内促炎性小胶质细胞。研究表明，小胶质细胞靶向敲低circMBNL1显著抑制小胶质细胞活化，减少促炎细胞因子释放，缓解星形胶质细胞功能障碍，抑制血脑屏障渗漏和外周免疫细胞浸润，从而有效减轻慢性不可预测应激小鼠模型中的神经炎症反应并改善抑郁样行为。

图2

MDD患者中circMBNL1表达上调。(A) MDD患者和健康对照血浆中circMBNL1的表达水平（每组n=40）。P < 0.001 vs. HC。(B) 血浆circMBNL1与HAMD-24评分的相关性。(C) circMBNL1区分MDD患者与健康对照的ROC曲线。(D) MDD患者抗抑郁治疗第0天和第14天血浆circMBNL1表达水平（每组n=21）。P < 0.001 vs. HC。(E) 应答MDD患者中ΔcircMBNL1与ΔHAMD-24评分的相关性。(F) 基于MDD患者circMBNL1的Δ值（第14天拷贝数/µL减去第0天拷贝数/µL）计算的ROC曲线。(G) 有或无CUS处理小鼠血浆和脑中的circMBNL1水平（每组n=6）。P < 0.001 vs. 对照组。(H) 从对照和CUS小鼠脑中分选神经元富集细胞（NCAM-1⁺）、星形胶质细胞（ACSA-2⁺）和小胶质细胞（CD11b⁺CD45ᵈⁱᵐ）的门控策略。(I) qPCR分析分选细胞群体中circMBNL1的相对表达水平（每组n=3）。P < 0.05，P < 0.01，***P < 0.001 vs. 对照组。

图3

NP-siRNA和TNP-siRNA的制备与表征。(A) 经MG1靶向肽修饰或未修饰并负载siRNA的PEG-PEI基纳米颗粒。(B) 不同重量比下PEI和siRNA的琼脂糖凝胶电泳。(C-E) NP-siRNA和TNP-siRNA的粒径(C)、PDI (D)和Zeta电位(E)。（每组n=6）。(F) NP-siRNA和TNP-siRNA的TEM图像。比例尺：500 nm。(G) NP-siRNA和TNP-siRNA在FBS（1%）中48小时的稳定性测试。（每组n=3）。(H) 不同pH条件（7.4和5.8）下Cy5-siRNA体外模拟释放曲线（释放比-时间）。（每组n=3）

图4TNP-si-circMBNL1的体外转染效率。(A) 原代小胶质细胞或LPS激活的原代小胶质细胞与NP-Cy5-siRNA或TNP-Cy5-siRNA孵育4小时后的流式细胞术分析。(B) NP和TNP制剂处理后原代小胶质细胞中Cy5-siRNA的荧光强度。P < 0.001 vs. LPS+NP-siRNA组。(C) 处理4小时后原代小胶质细胞的CLSM图像。TNP为红色（Cy5-siRNA标记），细胞核为蓝色（DAPI标记）。比例尺：50 μm。(D) LPS预处理后原代小胶质细胞中circMBNL1水平，在转染不同量TNP-si-circMBNL1（每孔50 nM、100 nM和200 nM siRNA）24小时后通过RT-qPCR测定。P < 0.001 vs. 对照组。(E-F) LPS刺激的原代小胶质细胞经TNP-si-circMBNL1（每孔100 nM siRNA）处理24小时后TNF-α (E)和IL-6 (F)的相对表达水平。P < 0.01，*P < 0.001 vs. 对照组；###P < 0.001 vs. LPS组。(G) LPS刺激的原代小胶质细胞经TNP-si-circMBNL1处理24小时后iNOS表达的蛋白质印迹分析。(H) LPS刺激的原代小胶质细胞经TNP-si-circMBNL1处理24小时后iNOS（Alexa Fluor 594，红色）的代表性免疫染色图像。细胞核以DAPI（蓝色）复染。比例尺：20 μm。

图5

TNP增强了si-circMBNL1在体内向脑小胶质细胞的靶向递送效率。(A) 鼻内给予TNP-Cy5-siRNA后小鼠体内Cy5-siRNA的代表性活体荧光成像。(B-C) 鼻内给予TNP-Cy5-siRNA后0、6、12和24小时小鼠脑中Cy5标记TNP的荧光成像及定量。（每组n=3）。P < 0.01，P < 0.001 vs. 0小时组（0小时代表鼻内给药前基线）。(D) 鼻内给予TNP-Cy5-siRNA后12小时小鼠脑小胶质细胞中Cy5-siRNA荧光的代表性荧光图像。（每组n=3）。比例尺：50 μm。(E) CUS预处理后小鼠脑中circMBNL1水平，在鼻内给予TNP-si-circMBNL1后不同时间点通过qPCR测定。（每组n=3）。P < 0.05，**P < 0.01 vs. 0小时组。(F) 与PBS处理对照相比，用TNP-si-NC或TNP-si-circMBNL1处理的正常健康小鼠外周免疫细胞（CD4⁺ T细胞、免疫抑制性Treg细胞和促炎性Th17细胞）的流式细胞术分析（每组n=6）。

总结

重度抑郁症缺乏有效的circRNA靶向递送策略。我们发现circMBNL1在患者血浆中显著上调，且与抑郁量表评分正相关，并在慢性应激小鼠脑内小胶质细胞中同步升高。为实现细胞特异性敲低，以MG1肽修饰的PEG/PEI纳米颗粒负载siRNA，经鼻内给药靶向活化小胶质细胞。该体系有效降低circMBNL1表达，改善慢性不可预测应激诱导的抑郁样行为，验证了circMBNL1作为治疗靶点的可行性。

该工作将抑郁症的核酸靶点从神经元拓展至小胶质细胞，并利用肽引导纳米颗粒实现经鼻脑内递送，绕过了血脑屏障。未来可筛选其他应激相关circRNA，构建多靶点干预组合。MG1肽的靶向策略可适配不同神经炎症状态下的递送需求。鼻内给药适合需要长期、反复用药的慢性精神疾病，患者依从性较高。circMBNL1的下游调控网络及其在不同抑郁亚型中的表达差异仍需深入解析，但该策略为精神疾病的核酸治疗提供了可转化的递送框架。

参考文献：

DOI:10.1186/s12951-026-04734-2

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